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Calu-3人肺腺癌 (胸水)注意事項

更新時間:2024-06-26      點(diǎn)擊次數(shù):915

Calu-3人肺腺癌 (胸水)注意事項:

1)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。

2)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度。

3)對于生長不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 

實(shí)驗材料: 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25% 1瓶;PBS(-)1 瓶 

2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞

3、50ml離心筒2個 

4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊; 

7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 

8、酒精燈1臺; 


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